過(guò)氧化氫酶是一種普遍存在于幾乎所有生物體內(nèi)的一種抗氧化酶,主要分布于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、動(dòng)物的肝和紅細(xì)胞中。它是過(guò)氧化物酶體的標(biāo)志酶, 約占過(guò)氧化物酶體酶總量的40%。
過(guò)氧化氫酶是由四個(gè)多肽鏈組成的同源四聚體,每一個(gè)亞基含有超過(guò)500個(gè)氨基酸殘基,且每個(gè)亞基的活性位點(diǎn)都含有一個(gè)卟啉血紅素基團(tuán),用于催化過(guò)氧化氫的反應(yīng)。過(guò)氧化氫酶的最適pH接近7,最適溫度則因物種而異。
過(guò)氧化氫酶的主要作用是催化過(guò)氧化氫分解為水和氧氣,清除體內(nèi)的過(guò)氧化氫,從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害,是生物防御體系的關(guān)鍵酶之一,為機(jī)體提供了抗氧化防御機(jī)理。不同來(lái)源的酶有不同的結(jié)構(gòu),在不同組織中酶的活性水平也不同,過(guò)氧化氫在肝臟中分解速度比在腦或心臟等器官快,因?yàn)楦闻K中的CAT含量水平高。
Abbkine過(guò)氧化氫酶活性分析試劑盒利用過(guò)氧化氫酶的過(guò)氧化物酶活性來(lái)進(jìn)行測(cè)定。在合適濃度的H2O2存在的條件下,過(guò)氧化氫酶與甲醇反應(yīng),產(chǎn)生甲醛,生成的甲醛可以與顯色物反應(yīng),產(chǎn)物可以在540nm處測(cè)量吸光度,樣本中的過(guò)氧化氫酶活性與OD值成正比。
目前市面上大部分過(guò)氧化氫酶試劑盒是利用殘余的過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶的催化下氧化生成有色底物,間接檢測(cè)過(guò)氧化氫酶活性,但此方法樣本中其他的過(guò)氧化物酶可能會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,而且可能會(huì)由于過(guò)氧化氫不穩(wěn)定而導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線誤差。Abbkine過(guò)氧化氫酶 (CAT) 活性分析試劑盒具有優(yōu)勢(shì),直接檢測(cè)酶活,測(cè)值更準(zhǔn)確,特異性更高。因?yàn)榧状际沁^(guò)氧化氫酶的底物,其他過(guò)氧化物酶不能利用甲醇做底物,所以避免了干擾信號(hào)。
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