作用:
蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增強探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號。
但蛋白酶K濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞結構有一定的破壞,導致組織切片脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果。
EDTA緩沖液可以代替蛋白酶K的作用,解決上述出現(xiàn)的問題,并能達到理想的染色效果。
保存方法:
保存在-20℃的冰箱里,避免反復凍融,有效保證12個月。
孵育溫度為55-65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時,理想孵育時間為2小時
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